来自超嗜热古菌的新型耐热DNA聚合酶
研究人员从超嗜热古菌Pyrolobus fumarii A1中鉴定并纯化了一种B家族DNA聚合酶,具有极高的热稳定性和保真度,有望成为分子生物学工具。
热稳定DNA聚合酶是分子生物学中不可或缺的工具,但来自极端超嗜热菌的酶大多未被表征。近日,研究人员报道了从Pyrolobus fumarii A1中分离的一种B家族DNA聚合酶Pyrfu pol的生化与结构特征。
该酶在大肠杆菌中高效表达,并通过热结合固定化金属亲和层析法纯化至均一。生物信息学分析确认了典型的B家族结构,AlphaFold模型显示其具有紧凑的折叠和丰富的离子相互作用,可能赋予其高热稳定性。
生化实验表明,Pyrfu pol在高温下保持活性,且保真度优于常用Taq聚合酶。该研究为开发新型高效率、高保真的PCR工具提供了候选酶。注意:本研究为预印本,尚未经同行评审。