bioRxiv preprint Score 70

改造Fanzor2催化位点激活反式切割

研究发现,通过关键催化位点的改造,可激活Fanzor2的DNA和RNA触发的反式切割活性,为诊断应用提供新工具。

Fanzors是真核生物中的RNA引导核酸内切酶,通常仅具有顺式切割活性。近日,研究人员发现,通过改造Acanthamoeba polyphaga mimivirus Fanzor2(ApmFz2)的RuvC-II催化位点,可激活其强大的反式切割活性。代表性变体ApmFz2-EP能实现DNA和RNA触发的反式切割,同时顺式切割活性减弱,对TAM序列的依赖性降低,仅需7个核苷酸的引导-靶标互补即可激活。机制分析表明,解除保守谷氨酸周围的位阻是激活的关键。该研究为开发基于Fanzor的诊断工具提供了新思路。注:该研究为预印本,尚未经同行评审。

gene editingRNA-guided endonucleaseFanzor