质谱+纳米孔测序:RNA修饰图谱更准确
新研究结合质谱与纳米孔测序,揭示MS2噬菌体RNA修饰图谱,并指出纳米孔技术需正交验证。
RNA修饰在基因调控中至关重要。近日,发表于bioRxiv的一项预印本研究首次系统比较了液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)与纳米孔直接RNA测序(DRS)在绘制RNA修饰图谱中的表现。研究以MS2噬菌体为模型,LC-MS/MS检出13种修饰,而纳米孔DRS仅检出8种,且部分修饰如假尿苷仅在质谱中可见。
研究还发现,牛津纳米孔公司最新推出的RNA004化学试剂和Dorado碱基识别器虽然能识别8种常见RNA修饰,但存在假阳性问题。例如,在检测m6A时,纳米孔DRS可能将其他修饰误判,导致结果偏差。
作者强调,单独依赖纳米孔测序可能产生误导,整合质谱等正交方法是获得可靠RNA修饰谱的关键。该研究尚未经同行评审,但为RNA表观转录组学分析提供了重要参考。